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用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基檢測沉降菌

  用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基檢測沉降菌測試方法
  方法概述
  本測試方法采用沉降法,即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿,經(jīng)若干時間,在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù),以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù),并以此來評定潔凈室(區(qū))的潔凈度。
  所用的儀器和設(shè)備
 ?、鸥邏合惧?/div>
  使用時應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書操作。
  ⑵恒溫培養(yǎng)箱
  必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進(jìn)行檢定。
 ?、桥囵B(yǎng)皿
  一般采用?90mm×15mm的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。
 ?、扰囵B(yǎng)基
  普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認(rèn)可的培養(yǎng)基。其配制方法見附錄A(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)。
  測試步驟
  ⑴采樣方法
  將已制備好的培養(yǎng)皿按5.4.1.2的要求放置,打開培養(yǎng)皿蓋,使培養(yǎng)基表面暴露0.5h,再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。
  ⑵培養(yǎng)
 ?、偃坎蓸咏Y(jié)束后,將培養(yǎng)倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
  ②在30℃~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),時間不少于48h。
 ?、勖颗囵B(yǎng)基應(yīng)有對照試驗,檢驗培養(yǎng)基本身是否污染。可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。
 ?、蔷溆嫈?shù)
 ?、儆萌庋壑苯佑嫈?shù),標(biāo)記或在菌落計數(shù)器上點計,然后用5~10倍放大鏡檢查,不否遺漏。
 ?、谌襞囵B(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊,可分辨時仍以2 個或2個以上菌落計數(shù)。
  注意事項
  ⑴測試用具要作滅菌處理,以確保測試的可靠性、正確性。
  ⑵采取一切措施防止人為對樣本的污染。
 ?、菍ε囵B(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。
  ⑷由于細(xì)菌種類繁多,差別甚大,計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察,不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉定物的區(qū)別,必要時用顯微鏡鑒別。
 ?、刹蓸忧皯?yīng)仔細(xì)檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量,如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。
  測試規(guī)則
 ?、艤y試狀態(tài)
 ?、俪两稻鷾y試前,被測試潔凈室(區(qū))的溫濕度須達(dá)到規(guī)定的要求,靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。
  ②沉降菌測試前,被測試潔凈室(區(qū))已經(jīng)過消毒。
 ?、蹨y試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種,測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求,并在報告中注明測試狀態(tài)。
 ?、茰y試人員
 ?、贉y試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。
  ②靜態(tài)測試時,室內(nèi)測試人員不得多于二人。
  ⑶測試時間
 ?、賹蜗蛄鳎?00級凈化房間及層流工作臺,測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10min后開始。
  ②對非單向流,如10 000級、100 000級以上的凈化房間,測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30min后開始。
 ?、瘸两稻嫈?shù)
  采樣點數(shù)目及其布置
  ②較少采樣點數(shù)目
  沉降法的較少采樣點數(shù)可按表1確定。
  表1  較少采樣點數(shù)目
  在滿足較少測點數(shù)的同時,還宜滿足較少培養(yǎng)皿數(shù),見表2。
  表2  較少培養(yǎng)皿數(shù)
  ③采樣點的布置
  采樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。
  )工作區(qū)采樣點的位置離地0.8m~1.5m左右(略高于工作面)。
  )可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加采樣點。
  采樣點位置的詳細(xì)規(guī)則見附錄B(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)。
 ?、捎涗?/div>
  測試報告中應(yīng)記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態(tài)。
  測試報告的編寫見附錄C(標(biāo)準(zhǔn)的附錄)。
 ?、式Y(jié)果計算
  ①用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。
  ②平均菌落數(shù)的計算,見式(1)。
  平均菌落數(shù)M=              ……………(1)
  式中:M——平均菌落數(shù);
  ——1號培養(yǎng)皿菌落數(shù);
  ——2號培養(yǎng)皿菌落數(shù);
  ——n號培養(yǎng)皿菌落數(shù);
  ——培養(yǎng)皿總數(shù)。
 ?、私Y(jié)果評定
  用平均菌落數(shù)判斷潔凈室(區(qū))空氣中的微生物。
 ?、贊崈羰遥▍^(qū))內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標(biāo)準(zhǔn)。
 ?、谌裟碀崈羰遥▍^(qū))內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn),則必須對此區(qū)域先進(jìn)行消毒,然后重新采樣兩次,測試結(jié)果均須合格。
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