淺談顯微鏡的分辨率?
顯微鏡的分辨率用它能清晰地分辨試樣上兩點(diǎn)間的較小距離。分辨率決定了顯微鏡分辨試樣上細(xì)節(jié)的程度。顯微鏡的物鏡是使物體放大成一實(shí)像,目鏡的作用是使這個(gè)實(shí)像再次放大;這就是說目鏡只能放大物鏡已分辨的細(xì)節(jié),物鏡未能分辨的細(xì)節(jié),決不會(huì)通過目鏡放大而變得可分辨。因此顯微鏡的分辨率主要取決于物鏡的分辨率。對(duì)于一定波長(zhǎng)的入射光,物鏡的分辨率完全取決于物鏡的數(shù)值孔徑;數(shù)值孔徑越大,分辨率就越高。
為了充分利用物鏡的分辨率,使操作者看清已被物鏡分辨出的組織細(xì)節(jié),顯微鏡必須有適當(dāng)?shù)姆糯舐?。人眼睛能看清的組織細(xì)節(jié)對(duì)眼睛的視角應(yīng)大于眼睛的極限分辨角。
焦深(垂直分辨率)
焦深是指物鏡對(duì)高低不平的物體能夠清晰成像的能力。當(dāng)顯微鏡準(zhǔn)確聚焦于某一物面時(shí),如果位于其前面及后面的物面仍然能被觀察者看清楚,則該較遠(yuǎn)亮平面之間的距離就是焦深。物鏡的焦深組要取決于物鏡的數(shù)值孔徑。
工作距離與視場(chǎng)范圍
物鏡的工作距離是指顯微鏡準(zhǔn)確聚焦后,試樣表面與物鏡的前端之間的距離。物鏡的放大率越高,工作距離越短。因此觀察調(diào)焦時(shí)需要格外細(xì)心,一般應(yīng)使物鏡朝離開實(shí)物方向運(yùn)行。
視場(chǎng)范圍是指顯微鏡中所觀察到的試樣表面區(qū)域的大小。視場(chǎng)范圍與物鏡的放大率成反比。普通物鏡初次放大實(shí)像的直徑一般為18mm。平視場(chǎng)物鏡初次放大實(shí)像直徑可達(dá)28mm,視場(chǎng)范圍大大增加。